作者：宇文婷1，罗雅妮1，黎满慧1，史菲2，熊轶1

单位：

1.518036 广东省深圳市，深圳北京大学香港科技大学医学中心生物医学研究所　2.518020 广东省深圳市人民医院 深圳市呼吸疾病研究所

关键词：

哮喘；气道重塑；微小RNA-107；肌细胞，平滑肌；细胞增殖；细胞运动

CLC：

R 562.25

DOI：

10.12114/j.issn.1008-5971.2021.00.113

Funds：

广东省自然科学基金资助项目（2020A1515011040）

摘要：

背景　微小RNA-107（miRNA-107）在多种肿瘤（如膀胱癌、乳腺癌）的发生发展过程中具有重要 作用，但其在过敏性哮喘发生发展中的作用尚不完全清楚。目的　探讨miRNA-107 对气道平滑肌细胞（ASMCs）增 殖和迁移的影响。方法　本研究时间为2019 年9 月—2020 年12 月。原代培养SPF 级雌性BABL/c 小鼠的ASMCs， 运用免疫荧光鉴定ASMCs。将细胞随机分为miRNA-107 模拟物组（miRNA-107 mimic 组）、模拟物对照组（mimic NC 组）和miRNA-107 抑制剂组（miRNA-107 inhibitor 组）、抑制剂对照组（inhibitor NC 组）。miRNA-107 mimic 组和mimic NC 组的细胞分别转染5 μl 20 μmol/L 的miRNA-107 mimic 或5 μl 20 μmol/L 的mimic NC+7.5 μl viafect+200 μl Opti-MEM 无血清培养基；miRNA-107 inhibitor 组和inhibitor NC 组的细胞分别转染10 μl 20 μmol/L 的 miRNA-107 inhibitor 或10 μl 20 μmol/L 的inhibitor NC+15 μl viafect+200 μl Opti-MEM 无血清培养基。采用荧光定 量试剂盒检测各组ASMCs 中miRNA-107 相对表达水平，BrdU 细胞增殖检测试剂盒（比色分析法）检测各组细胞增殖 能力（吸光度差值），穿梭小室检测各组细胞迁移能力（迁移细胞数）。分别比较miRNA-107 mimic 组与mimic NC 组、miRNA-107 inhibitor 组与inhibitor NC 组ASMCs 中miRNA-107 相对表达水平、细胞增殖能力和细胞迁移能力。结 果　ASMCs 从组织块周围呈放射状萌出，7 d 后逐渐长满培养瓶，呈谷峰状；首次传代后，ASMCs 呈梭形，多有突起， 生长致密且平行排列；培养2 代后的ASMCs 经免疫荧光鉴定后有绿色荧光；经鉴定，99% 以上的细胞均是ASMCs。 miRNA-107 mimic 组ASMCs 中miRNA-107 相对表达水平高于mimic NC 组，吸光度差值、迁移细胞数低于mimic NC 组 （P ＜ 0.05）。miRNA-107 inhibitor 组ASMCs 中miRNA-107 相对表达水平低于inhibitor NC 组，吸光度差值、迁移细 胞数高于inhibitor NC 组（P ＜ 0.05）。结论　miRNA-107 可以抑制ASMCs 的增殖和迁移。抑制miRNA-107 的表达 可以促进ASMCs 的增殖和迁移，这可能是哮喘患者发生气道重塑的机制之一。因此，miRNA-107 有望作为抑制气道 重塑的一个靶点，为哮喘的治疗提供新的方法。

ReferenceList：